免疫PCR技术知识分享

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今天要与大家分享的内容是免疫PCR技术。

免疫PCR(Immuno-PCR或简称Im-PCR)是一种结合抗原抗体反应特异性与PCR扩增高灵敏性的检测技术,主要用于微量抗原的检测。其核心原理是将DNA标记物通过连接分子与抗原抗体复合物结合,再通过PCR扩增DNA信号,从而定量或定性分析抗原。 免疫PCR通过整合免疫学与分子生物学技术,成为高灵敏抗原检测的重要工具,尤其适用于痕量分析。未来改进方向包括简化操作流程、优化连接分子设计及开发自动化检测平台。

与其他技术相对比,如ELISA:是一种免疫测定,目前有三种不同类型的ELISA。直接ELISA,夹心ELISA和竞争ELISA。其中夹心法用于检测大分子,竞争法用于检测小分子。ELISA易于操作,运行相对便宜,并且可用于高通量筛选。 PCR是用于扩增特定DNA片段的技术。传统PCR扩增的产物DNA在凝胶上运行并用溴化乙锭染色。实时定量PCR(qPCR),将PCR产物的产生与荧光强度相关联,通过监控其荧光信号进行核酸检测与定量。qPCR非常灵敏,且比免疫检测具有更宽的动态范围。

免疫PCR技术有ELISA技术不可比拟的优势,如超高灵敏度,比传统ELISA敏感度高出10⁵倍以上,可检测超低浓度抗原。 特异性强,依赖抗原抗体的特异性结合,减少交叉反应风险。适用性广等。

免疫PCR技术已在多个领域应用,如医疗诊断、生物研究、食品安全与环境监测等。

从1991年至2025年,发表Immuno-PCR相关文献约286篇。 说明该技术在30几年的发展过程中已逐渐成熟。

下面介绍一篇代表性文章,是2024年发表在Analytical Chemistry 期刊上,Multiplexed miRNA and Protein Analysis Using Digital Quantitative PCR in Microwell Arrays。文章作者开发了微流控数字定量PCR 技术,通过使用单一的检测化学方法,在多重检测中同时定量miRNA和蛋白靶标。 这种简化的分析是通过在微流控阵列平台中整合碱基堆叠PCR(base-stacking PCR )和免疫PCR(immuno-PCR )实现的。

感谢您的观看,下期视频再见。

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